Tìm hiểu về Gene Cloning và Vectors

Khi các nhà di truyền học sử dụng các mẩu DNA nhỏ để nhân bản một gen và tạo ra một sinh vật biến đổi gen (GMO), DNA đó được gọi là vector.

Vectors phải làm gì Với Gen và Cloning

Trong quá trình nhân bản phân tử, vector là một phân tử DNA đóng vai trò là chất vận chuyển để chuyển hoặc chèn (các) gen ngoại lai vào một tế bào khác, nơi nó có thể được nhân rộng và / hoặc thể hiện. Các vector là một trong những công cụ thiết yếu để nhân bản gen và hữu ích nhất nếu chúng mã hoá một số loại gen marker mã hóa một phân tử sinh học có thể đo được trong một đánh giá sinh học để đảm bảo sự chèn và biểu hiện của chúng trong cơ thể chủ.

Cụ thể, một vector nhân bản là DNA lấy từ một virut, plasmid hoặc các tế bào (của các sinh vật cao hơn) để được chèn với một đoạn DNA nước ngoài cho các mục đích nhân bản. Vì vectơ nhân bản có thể được duy trì ổn định trong một cơ thể, vector cũng có các tính năng cho phép chèn hoặc loại bỏ DNA một cách thuận tiện. Sau khi được nhân bản vào một vectơ nhân bản, đoạn DNA có thể được nhân bản lại thành một vector khác có thể được sử dụng với độ đặc hiệu thậm chí nhiều hơn.

Trong một số trường hợp, vi rút được sử dụng để lây nhiễm vi khuẩn. Những virut này được gọi là bacteriophages, hoặc phage, cho ngắn. Retroviruses là các vector tuyệt vời để đưa gen vào tế bào động vật. Plasmid, là những mảnh tròn của DNA, là những vectơ được sử dụng phổ biến nhất để đưa DNA ngoại lai vào các tế bào vi khuẩn. Họ thường mang gen kháng thuốc kháng sinh có thể được sử dụng để kiểm tra sự biểu hiện của plasmid DNA, trên các đĩa petri kháng sinh.

Chuyển gen sang tế bào thực vật thường được thực hiện bằng vi khuẩn đất Agrobacterium tumefaciens 999, hoạt động như một vector và chèn một plasmid lớn vào tế bào chủ. Chỉ những tế bào có chứa vectơ nhân bản sẽ phát triển khi có kháng sinh.

Các loại chính của các dòng Cloning

Sáu loại chính của vectơ là: Plasmid

. ADN ngoại bào ngoại bào tự tái tạo bên trong tế bào vi khuẩn. Plasmid thường có số bản sao cao, chẳng hạn như pUC19 có số bản sao từ 500-700 bản mỗi tế bào. Phage.

Các phân tử ADN tuyến tính có nguồn gốc từ bacteriophage lambda. Có thể được thay thế bằng DNA nước ngoài mà không làm gián đoạn chu trình sống của nó.

Cosmids.

• Một phân tử ADN ngoại bào tròn khác kết hợp các tính năng của plasmid và phage. Nhiễm sắc thể nhân tạo.
• Dựa trên plasmid vi khuẩn mini-F. Nhiễm sắc thể nhân tạo men.
• Đây là một nhiễm sắc thể nhân tạo có chứa telomeres (các bộ đệm dùng một lần tại các đầu của nhiễm sắc thể được cắt bỏ trong quá trình phân chia tế bào) với nguồn gốc của sự tái tạo, một men trung gian (một phần của một nhiễm sắc thể liên kết các nhiễm sắc thể cùng một hoặc một dyad) một điểm đánh dấu có thể lựa chọn để xác định trong các tế bào nấm men. Nhiễm sắc thể nhân tạo nhân tạo.
• Loại véc tơ này là
• có tiềm năng hữu ích cho việc đưa gen vào tế bào người, và là công cụ để nghiên cứu biểu hiện và xác định chức năng NST của người. Nó có thể mang một đoạn ADN rất lớn. Tất cả các vector thiết kế có nguồn gốc nhân bản (replicator), một địa điểm nhân bản (nằm nơi chèn ADN ngoại lai không làm gián đoạn việc nhân bản hoặc không hoạt động các dấu hiệu cần thiết), và một marker đánh dấu lựa chọn (điển hình là một gen cung cấp khả năng đề kháng với một kháng sinh).