Hướng dẫn để tạo ra một bộ đệm đơn giản Phosphate

Điều gì làm cho bộ đệm phosphate nổi bật? Thứ nhất, bởi vì nó chứa ba proton axit, axit photphoric có nhiều hằng số phân ly và có thể được sử dụng để tạo các bộ đệm cho một trong ba độ pH tương ứng.

Ba giá trị pKa đối với axit photphoric (từ Cẩm nang Hóa học và Vật lý của CRC) là 2,16, 7,21 và 12. 32. Monosodium phosphate và cơ sở liên hợp của nó, disodium phosphate thường được sử dụng để tạo ra các bộ đệm pH giá trị khoảng 7, cho các ứng dụng sinh học, như được hiển thị ở đây.

Làm bộ đệm này là một chút khó khăn hơn so với làm cho bộ đệm TAE và TBE. Nó không phải là cực kỳ khó khăn, tuy nhiên. Đơn giản chỉ cần trung bình. Cần khoảng 10 phút để kích hoạt bộ đệm này. Đây là cách.

1. Quyết định các thuộc tính của Bufor

Trước khi tạo ra một bộ đệm, trước hết bạn cần biết lượng phân tử mà bạn muốn, khối lượng cần tạo ra và độ pH mong muốn. Hầu hết các bộ đệm hoạt động tốt nhất ở nồng độ giữa 0,1 M và 10 M. Độ pH phải nằm trong phạm vi 1 đơn vị độ pH của axit / liên hợp pKa. Để đơn giản, tính toán mẫu này sẽ là 1 lít bộ đệm.

2. Xác định tỷ lệ axit với bazơ

Sử dụng phương trình Henderson-Hasselbalch (dưới đây) để xác định tỷ lệ axit cần thiết để tạo ra một đệm độ pH mong muốn. Sử dụng giá trị pKa gần độ pH mong muốn của bạn và tỷ số này sẽ tương ứng với cặp liên hợp axit-bazơ tương ứng với pKa đó.

HH Phương trình: pH = pKa + log ([Base] / [Acid])

Đối với một đệm độ pH 6.9, [Base] / [Acid] = 0. 4898

-3->

Thay thế cho [Acid] và Solve cho [Base]

Độ phân giải mong muốn của đệm là tổng của [Acid] + [Base].

Với bộ đệm 1M, [Base] + [Acid] = 1 và [Base] = 1 - [Acid]

Bằng cách thay thế phương trình này vào phương trình tỷ lệ, từ bước 2, bạn sẽ có được: < Sử dụng phương trình: [Base] = 1 - [Acid], bạn có thể tính toán rằng:

[Base] = 0 [Acid] = 0. 6712 moles / L

3288 moli / L

3. Sau khi bạn đã sử dụng phương trình Henderson-Hasselbalch để tính tỷ lệ axit cần thiết cho đệm, hãy chuẩn bị dưới 1 lít dung dịch sử dụng đúng lượng monosodium phosphate và disodium phosphate .

4. Kiểm tra độ pH

Sử dụng đầu dò pH để xác nhận độ pH chính xác cho bộ đệm. Điều chỉnh nhẹ khi cần thiết, sử dụng axit photphoric hoặc natri hydroxyd (NaOH).

5. Hiệu chỉnh Khối lượng

Khi đã đạt đến pH mong muốn, mang khối lượng đệm đến 1 lít. Sau đó pha loãng bộ đệm theo ý muốn. Bộ đệm tương tự này có thể được pha loãng để tạo ra các bộ đệm của 0. 5 M, 0. 1 M, 0. 05 M hoặc bất cứ thứ gì ở giữa.

6. Lời khuyên cho Buffer

Hãy nhớ rằng pKa không phải là dễ dàng đo đến một giá trị chính xác.Các giá trị khác nhau có thể có sẵn trong tài liệu từ nhiều nguồn khác nhau.

7. Những gì bạn cần

Để làm bộ đệm, bạn sẽ cần ba chất, trong khi các vật liệu còn lại là thiết bị. Các chất này là monosodium phosphate, disodium phosphate, và axit phosphoric hoặc sodium hydroxide để điều chỉnh độ pH.

Bạn cũng cần một đồng hồ đo pH và thăm dò và các thiết bị phòng thí nghiệm phù hợp. Điều này bao gồm bình định mức, bình xi-lanh, cốc và thanh khuấy.

Cuối cùng, bạn sẽ cần một cái bếp nóng.