Làm thế nào để đông lạnh-khô một nền văn hoá vi khuẩn (đồng trùng hợp)

Làm khô lanh, còn gọi là đông khô hoặc cry crypticcation, là quá trình loại bỏ nước khỏi một sản phẩm sau khi nó đông lạnh (và sau đó đặt dưới chân không) cho phép đá thay đổi từ chất rắn sang hơi, mà không đi qua một pha lỏng. Băng (hoặc các dung môi đông lạnh khác) được loại bỏ khỏi sản phẩm thông qua quá trình thăng hoa và các phân tử nước bị ràng buộc sẽ được loại bỏ thông qua quá trình giải hấp.

Một trong những cách tốt nhất để lưu giữ vi khuẩn, nấm, nấm men hoặc các vi sinh vật khác trong một thời gian dài là sử dụng quá trình làm khô bằng đông lạnh. Thủ tục phòng thí nghiệm ngắn này có thể được thực hiện với bất kỳ máy sấy đông lạnh nào có thể bảo quản bộ sưu tập của bạn. Do quá trình đông khô là phương pháp sấy phức tạp và tốn kém nhất, quá trình này thường chỉ giới hạn ở các vật liệu nhạy cảm, nhạy nhiệt với giá trị cao. Các chất không bị hư hỏng do đông lạnh thường có thể được làm khô để không cần trữ lạnh.

Quá trình này có thể mất ít nhất là ba giờ, và chỉ cần 24 giờ, không bao gồm thời gian tăng trưởng văn hoá.

Bước đầu tiên của quá trình Lyophilization

Trước hết, nuôi cấy một nền văn hoá qua đêm, hoặc bãi cỏ, của vi sinh vật trên LB hoặc đĩa thạch dinh dưỡng thích hợp khác.

Tiếp theo, chuẩn bị các bình nắp vô trùng vô trùng bằng cách hấp chín nồi hơi trước, với mũ (nút cao su) đặt lỏng lẻo trên đầu. Đặt các nhãn giấy in bằng dấu hiệu nhận dạng của văn hoá bên trong các ống trước khi hấp. Ngoài ra, sử dụng các ống với mũ được thiết kế để vô trùng.

2. Thêm 4 mL dung dịch đông khô vào đĩa. Nếu cần thiết, các tế bào có thể bị treo bằng một thanh thủy tinh vô trùng.

   Nhanh chóng chuyển dung dịch nuôi cấy vào lọ khử trùng. Thêm khoảng 1. 5 mL mỗi lọ. Seal với nắp cao su.

3. Ngưng hệ thống nuôi cấy bên trong lọ bằng cách đặt các lọ trong -20 độ Củ đá đông lạnh.

4. Một khi các nền văn hoá bị đông lạnh, hãy chuẩn bị máy làm đông lạnh bằng cách bật và cho phép thời gian ổn định nhiệt độ và điều kiện chân không. Thực hiện theo các hướng dẫn của nhà sản xuất đối với máy sấy đông đặc mà bạn đang sử dụng.

5. Cẩn thận, và vô trùng, đặt nắp lọ lỏng lên trên lọ, để hơi nước có thể trốn thoát trong quá trình sấy khô, và đặt các lọ vào buồng sấy đông. Áp dụng chân không vào khoang theo hướng dẫn của nhà sản xuất.

6. Cho phép thời gian nuôi cấy hoàn toàn khô ráo (khô). Điều này có thể mất từ ​​vài giờ đến qua đêm tùy thuộc vào khối lượng của mỗi mẫu và bạn có bao nhiêu mẫu.

7. Hủy bỏ các mẫu từ buồng sấy đông theo hướng dẫn của nhà sản xuất và ngay lập tức niêm phong các lọ với nắp cao su, sau đó các uốn uốn.

8. Bảo quản bộ sưu tập văn hoá đông khô ở nhiệt độ phòng.

9. Máy làm đông lạnh

10. Các chất dinh dưỡng hoặc các loại thạch khác thích hợp (và lồng ấp để nuôi cấy)

Thanh thuỷ tinh

• Chất đệm lấp đầy> (và một cái nêm để bôi mũ)
• Tủ đông
• Tham khảo:
• SP Scientific. Nguyên tắc cơ bản của sấy khô. // www. khoa học học thuật. com / làm khô bằng đông lạnh-thảo dược hóa học cơ bản /